Влияние биофлавоноида кверцетина на биохимические показатели слезной жидкости при ксенокератопластике в эксперименте

Abstract

Несмотря на многочисленные исследования во всем мире по усовершенствованию способов получения искусственных аналогов роговицы, их биомеханические свойства еще далеки от требований к качеству донорского материала, необходимых для проведения кератопластики. Поэтому использование для кератопластики роговицы свиней после децеллюляризации является альтернативным решением проблемы дефицита донорского материала. В этой связи оптимизация методов обработки донорской роговицы с целью повышения ее структурно-функциональных свойств является важной задачей трансплантологии. В свою очередь, использование биофлавоноидов, в данном случае кверцетина, обладающих репаративными свойствами, может значительно снизить вероятность развития воспалительного процесса в конъюнктиве и роговице в зоне трансплантата. Цель работы – исследование активности окислительно-восстановительных ферментов и кислой фосфатазы в слезной жидкости кроликов после ксенокератопластики и применении биофлавоноида кверцетина. Материал и методы. Бесклеточные децеллюляризованные эквиваленты стромы роговицы (ЭСР) получали из энуклеированных свиных глаз (Коган Б.М. и др., 2015). Часть ЭСР инкубировали в течение 3 часов в растворе кверцетина. Экспериментальные исследования выполнялись на кроликах породы шиншилла. Под общей анестезией на одном глазу животного производили послойную или интраламеллярную кератопластику ЭСР. Второй глаз оставался контрольным (интактным), в который инстиллировали физиологический раствор 4 раза в день. Часть животных на протяжении месяца получала инстилляции биофлавоноида кверцетина 4 раза в день. После оперативного вмешательства проводилась антимикробная и противовоспалительная терапия. Клиническое состояние переднего отдела глаза кроликов оценивали через день. Через четыре недели в слезной жидкости кроликов определяли активность лактатдегидрогеназы, малатдегидрогеназы и кислой фосфатазы. Полученные данные обрабатывались с использованием методов статистики. Результаты. Полученные экспериментальные данные свидетельствуют, что при инстилляции кверцетина степень выраженности патологических изменений в переднем отделе глаза в разные сроки наблюдения была значительно меньше при сравнении с группой кроликов, не получавших биофлавоноид. Установлено, что в слезной жидкости животных при применении ЭСР без инстилляций кверцетина при послойной и интраламеллярной кератопластике активность лактатдегидрогеназы была повышена на 26,4 и 24,3%, малатдегидрогеназы на 22,8 и 20,8%, а кислой фосфатазы на 20,7 и 18,4%, соответственно, относительно интактных глаз (р<0,05). В случаях применения ЭСР с дополнительной прединкубацией с кверцетина указанные изменения активности изучаемых ферментов были менее выражены. Повышение активности дегидрогеназ и кислой фосфатазы в слезной жидкости животных в отдаленный период может быть обусловлено нарушением проницаемости мембранных структур клеток и органелл роговично-конъюнктивального эпителия и развитием оксидативного стресса после проведения кератопластики. При проведении курса инстилляций кверцетина активность исследуемых ферментов в слезной жидкости значительно снижалась, значимо не отличаясь от контроля. Выводы. Таким образом, получено экспериментальное обоснование возможности применения биофлавоноида кверцетина с целью снижения степени выраженности воспалительного процесса при проведении кератопластики, что проявлялось в нормализации окислительно-восстановительных ферментов и кислой фосфатазы.