Изучение влияния стволовых клеток на течение воспалительного процесса в эксперименте на модели аутоиммунного переднего увеита

Abstract

Актуальность. Проблема лечения эндогенных увеитов является актуальной ввиду высокой заболеваемости в трудоспособном возрасте. Увеиты являются причиной слепоты и слабовидения у 10-35% переболевших [C.M. Guly, Forrester J.V., 2010, Зайнутдинова Г.Х. с соавт., 2011]. Лечение увеитов остается трудной задачей. Одним из перспективных направлений является разработка иммунопатогенетических подходов к терапии увеитов. Стволовые клетки обладают регуляторным действием, что открывает перспективы в лечении воспалительных заболеваний глаз. Цель. Изучить характер иммунологических эффектов при интравитреальном введении стволовых клеток на модели аутоиммунного увеита у кроликов. Материал и методы. Исследование проводилось на 16 кроликах породы Шиншилла на базе вивария ГУ «Институт ГБ и ТТ им. В.П. Филатова НАМН Украины». В процессе моделирования увеита животному проводилась общая сенсибилизация сывороткой лошадиной нормальной для бактериологических питательных сред. Сыворотка вводилась в бедро подкожно один раз в неделю в течение пяти недель. Затем вводилась разрешающая доза лошадиной сыворотки в переднюю камеру глаза. Для проведения эксперимента животные были разделены на две группы, по восемь кроликов в каждой группе. В первой группе (опытной) через неделю после введения разрешающей дозы в переднюю камеру глаза было проведено интравитреальное введение 0,05 мл стволовых клеток (доза 100 000 клеток) вартонова студня, полученных методом эксплантов. Во второй группе (контрольной) введение стволовых клеток не проводилось. Длительность наблюдения составила 4 недели. Тяжесть увеита оценивалась по степени воспалительной реакции (гиперемия конъюнктивы, опалесценция влаги передней камеры, наличие гипопиона и экссудатов в передней камере, преципитаты, синехии), степени отека и васкуляризации роговицы. Осуществлялась биомикроскопия и фотографирование глаз кроликов. Всем животным проводились развернутые иммунологические исследования – до начала эксперимента, после введения разрешающей дозы в переднюю камеру, перед интравитреальным введением стволовых клеток, после введения стволовых клеток и перед выводом из эксперимента. Иммунологические исследования включали в себя основные параметры иммунного статуса. Результаты. На второй день после введения разрешающей дозы у всех кроликов в обеих группах развился передний увеит. У животных первой и второй группы наблюдалась клиническая картина увеита тяжелой степени – смешанная инъекция, отек роговицы, преципитаты, опалесценция влаги передней камеры (феномен Тиндаля «+++»), гипопион и множественные задние синехии. Проведение офтальмоскопии не представлялось возможным из-за снижения прозрачности оптических сред глаза. Животным первой группы на фоне воспалительного процесса была произведена интравитреальная инъекция стволовых клеток. После инъекции стволовых клеток у животных первой группы было отмечено снижение воспалительного процесса (уменьшение отека роговицы, гипопион не определялся, количество преципитатов значительно уменьшилось – феномен Тиндаля «+»). Таким образом, введение стволовых клеток вызвало снижение воспалительного процесса в глазном яблоке. При этом в контрольной группе отмечалась интенсификация воспалительного процесса (смешанная инъекция, отек роговицы, преципитаты, опалесценция влаги передней камеры (феномен Тиндаля «+++»)). При иммунологическом исследовании отмечено значимое снижение содержания лейкоцитов (4,4±0,7 и 6,1±1,1), количества Т-лимфоцитов (41,0±4,5 % и 59,7±6,4 %) и Т-лимфоцитов-хелперов (33,3±4,2 % и 44,2±3,7 %), а также значимое увеличение фагоцитарной активности нейтрофилов (82,1±6,3 % и 65,3±3,7 %) по сравнению с контрольной группой. Вывод. Проведенное экспериментальное исследование на модели аутоиммунного увеита у кроликов показало, что введение стволовых клеток оказывает противовоспалительный и иммуномодулирующий эффект.